RAPD技术

发布时间      :2022-08-19浏览次数:2733

一.RAPD技术简介

运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记 。这种方法即为RAPD(RandomamplifiedpolymorphicDNA,随机扩增的多态性DNA)    。尽管RAPD技术诞生的时间很短 ,但由于其独特的检测DNA多态性的方式以及快速、简便的特点 ,使这个技术已渗透于基因组研究的各个方面 。

RAPD技术建立于PCR技术基础上,它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为10聚体)为引物      ,对所研究基因组DNA进行PCR扩增 。聚丙烯酰胺或琼脂糖电泳分离 ,经EB染色或放射性自显影来检测扩增产物DNA片段的多态性  ,这些扩增产物DNA片段的多态性反映了基因组相应区域的DNA多态性   。

二.RAPD技术流程 :

RAPD技术1

三.客户提供 :

★ 基因组DNA:

●至少15μL样品 ,浓度为50-100ng/μL;

●2%琼脂糖电泳检测有DNA主带,没有降解;

●DNA经过DNA纯化试剂盒或磁珠纯化;

●DNA需溶解在TE或灭菌的去离子水里;

●DNA溶解后,肉眼看不到杂色;

★ 植物材料 : 新鲜组织 ,叶片采用硅胶干燥后或干冰运输;

★ 动物材料  : 新鲜组织    ,无水乙醇封存低温运输;

RAPD技术2




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